多肽合成-多肽定制

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多肽问答

无锡迈默拓普可以提供一些稳定同位素修饰的多肽,主要有N15, C13 以及D代修饰,由于稳定同位素氨基酸原料都比较贵,建议选择一些简单氨基酸进行标记,如Gly,Val,Phe,Leu,Ala等。

影响合成多肽稳定性的因素包括脱酰胺、氧化、水解、二硫键错配、消旋、β-消除、聚集等,研究显示合成多肽中最常见的降解产物是脱酰胺产物、氧化产物、水解产物。在组成多肽的各种氨基酸中,天冬酰胺、谷胺酰胺易于发生脱酰胺反应(尤其是在pH值升高和高温条件下);甲硫氨酸、半胱氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸最易氧化,对光照也较为敏感;天冬氨酸参与形成的肽链较易断裂,尤其是Asp-Pro和Asp-Gly肽键。由于一个多肽分子中通常会含有多种不稳定性的氨基酸残基或肽键,因此合成多肽可能的降解机制和降解产物较为复杂。而多肽的聚集主要是由于疏水作用引发的,尽管目前还很难准确预测哪些多肽易发生聚集,但至少对于一些中长肽而言需对可能存在聚合物进行研究。

如果是合成C端是羧酸多肽以选择Wang Resin, 如果是合成C端是酰胺多肽可以择Rink Amide AM Resin或Rink Amide MBHA Resin. 如果是合成全保护多肽的可以选择2-Cl Trt Resin.

计算Fmoc保护氨基酸树脂Loading通常有二种,一种是增重法,增加的重量除以增加的分子量再除以树脂总的重量. 另外一种是通过紫外分析,目前本公司提供的都是紫外分析的Loading值.

DABCYL/ EDANS,DABCYL/6-FAM,TAMRA/6-FAM,Abz/Tyr(3-NO2), Mca/Dnp

通常荧光染料化合物带有羧酸或者NHS活化酯,所以与多肽接合时需要多肽有氨基官能团,所以通过在序列中可以修饰在Lys侧连氨基上,在C端时需要增加Lys或通过乙二胺(ED:NH2CH2CH2NH2)连进行连接。如Lys(Biotin),ED-Biotin,EDDnp等。

Maps是多重抗原多肽,是将线型多肽的C端连接在二个,四个等Lys上形成的分枝多肽,从而增大了整个分子的大小,通常有2支,4支,8支结构。合成Maps多肽时由于缩合时的不均一性,多肽产物与非目标肽性质相似,因而很难除HPLC纯化也很难提供质谱鉴定。建议进行氨基酸组分分析。

PEG修饰剂又称聚乙二醇修饰剂,修饰性PEG,PEG修饰剂等。是带有官能团的聚乙二醇,目前主要用于蛋白质药物修饰,以增加体内半衰期,降低免疫原性,同时还可以增加药物的水溶性。近几年来修饰性PEG在制药研发中应用广泛,在药物药效缓释中起到重要作用。

PEG修饰剂常见的修饰基团大致可总结如下: 氨基(-Amine)-NH2,氨甲基-CH2-NH2,马来酰亚胺-Mal,羧基-COOH,巯基(-Thiol)-SH,琥珀酰亚胺碳酸酯-SC,琥珀酰亚胺乙酸酯-SCM,琥珀酰亚胺丙酸酯-SPA,琥珀酰亚胺-NHS,丙酸基-CH2CH2COOH,醛基-CHO,丙烯酸基-Acrylate,丙烯酸基-AC,叠氮基-Azide,生物素基-Biotin,荧光素基-Fluorescein,戊二酸基-GA,酰肼基-Hydrazide,炔基-Alkyne等。 PEG修饰剂常见分类: (1)直链PEG修饰剂:mPEG (2)双官能团修饰剂:HCOO-PEG-COOH,NH2-PEG-NH2,OH-PEG-COOH,OH-PEG-NH2,HCL·NH2-PEG-COOH,MAL-PEG-NHS, (3)根据分子量的大小又有2000,3000,5000,10000,20000等 所以在进行PEG化修饰时需要确定PEG的种类,官能团要求以及分子量大小范围。

是的,Pseudoproline Dipeptides可以在多肽缩合中,减少多肽的Alpha转角以及Beta折叠空间结构的产生,使得多肽保持线性,有利于多肽的合成,提高多肽的粗品纯度。Pseudoproline的结构在多肽用TFA切割时同时会去掉,得到正常的多肽。Pseudoproline Dipeptides主要有Fmoc-AA-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH,Fmoc-AA-Thr(Psi(Me,Me)pro)-OH二大系列,AA代表氨基酸。如果有侧连的,侧连带保护。 如Fmoc-Ser(tBu)-Ser(Psi(Me,Me)pro)-OH Fmoc-Asp(OtBu)-Thr(Psi(Me,Me)pro)-OH