多肽合成-多肽定制

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多肽的溶解和保存

Mimotopes 2023-08-14

我们化学合成的多肽以冻干的形式提供。以下是我们经验丰富的多肽合成工程师整理的多肽保存技巧和使用时的多肽溶解建议,用以保持合成肽的完整性和活性。

多肽保存和处理

冻干多肽通常是稳定的,可在常温条件下运输。收到后,我们建议将多肽存放在冷冻干燥的地方。一般情况下,冻干肽可在室温下保存最多 1 个月,在冰箱中冷藏保存最多 1 年,需要长期保存时需要在-20℃以下保存。

将冻干多肽从冰箱中取出时,打开多肽瓶之前让小瓶升温至室温,以防止大气中的水凝结到多肽上。因为多肽通常具有吸湿性并且容易潮解。因此,为了防止多肽粉吸潮降解或者使多肽难以处理,我们建议根据您的实验要求对肽进行等分,并避免重复冻和频繁打开多肽包装瓶。 

含有 CysMet Trp 残基的多肽,容易氧化,这可能会导致多肽变色(褐变),时间久了可能会失去活性。因此,建议避免讲多肽暴露于空气中。

储存在溶液中的多肽稳定性较差,也容易受到微生物的影响。因此,我们建议使用 pH 5-6 的无菌缓冲液来溶解肽、等分样品,并在不使用时将溶液储存在 -20°C 下。使用 0.2 µm 过滤器过滤多肽溶液也可能有助于去除细菌污染。为了长期保存,还可以将多肽再次冷冻干燥以除去溶剂。

为了方便您的研究,我们可以提供多肽分装,方便使用。如需多肽合成报价,请与联系我们,我们会尽快给您回复。

多肽溶解

无锡迈默拓普生物科技有限公司提供的多肽以冻干形式提供,在用于各种检测之前需要溶解。寻找一种能够完全溶解多肽而不影响其稳定性,还能与实验兼容的溶剂可能是一个困难且费力的过程。以下是我们的多肽化学家提供的多肽溶解度测试提示。

多肽溶解的技巧

多肽的溶解度主要由肽序包含的氨基酸的物理性质决定的。氨基酸有疏水性和亲水性之分。疏水性氨基酸多的肽很难溶解在水中,可能需要使用有机溶剂。亲水性氨基酸残基越多,多肽就越容易溶解在水溶液中。氨基酸还有酸性碱性的差别,酸性多肽在碱性条件下在较高 pH 值下更易溶解,而整体呈碱性的肽在较低 pH 值下最易溶解。下面是确定多肽溶解最佳溶剂的操作建议。

·         进行溶解度测试时使用少量多肽,通常1毫克的量就可以了。

·         首次溶解未知溶解度的肽时,先从挥发性溶剂开始。方便将其从缓冲液中通过冻干去除,并在必要时再次尝试溶解。

·         计算多肽的净电荷,以确定肽是酸性还是碱性,并决定使用的最佳缓冲液 pH 条件。 

如果多肽的净电荷为正,则该肽呈碱性,可以用 10-30% 的乙酸溶液进行测试。相反,如果净肽电荷为负,则认为肽呈酸性,建议使用 0.5% 氢氧化铵溶液。如果您的多肽含有二硫键,请勿使用后一种方法,因为高 pH 值可能会导致二硫键断开。

·         对于中性肽,首先使用有机溶剂,例如乙腈、甲醇或异丙醇。对于疏水性很强的肽,二甲基亚砜 (DMSO) 在溶解肽方面特别有用,并且具有细胞耐受性的优点。但DMSO很难通过干燥除去,因此最好在多肽原液中加入少量高纯级DMSO直至溶解,然后缓慢加入水或缓冲溶液稀释DMSO的含量。持续且温和的搅动。如果多肽开始沉淀出来,则停止加水。使用其他有机溶剂时也可以用此操作流程。

·         注意,DMSO不适用于含有半胱氨酸的多肽,因为它会促进二硫键的形成。对于含有半胱氨酸的肽,可以使用DMF代替。

·         温和加热和超声处理有助于多肽溶解。对易于聚集的多肽,添加离液剂(例如 6 M 盐酸胍或 8 M 尿素)可能有助于破坏氢键并防止多肽凝胶化。

·         完全溶解的多肽为透明溶液。溶液浑浊,或者如果可以观察到颗粒,则表明多肽仍处未完全溶解状态,需要进一步测试。

我们的多肽合成工程师拥有多年的多肽合成研究经验,多肽溶解度测试,是我们多肽定制合成服务的一部分,如需要,请联系我们